2024-04-04 01:16:08

请问提完淋巴细胞DNA以后,修饰之后,DNA保存多久不影响其甲基化测定准确性?

各位,我最近要做几个基因启动子甲基化检测,标本是外周血,请问提完淋巴细胞DNA以后,必须马上测定么,如果不需要,那么能DNA保存多久不影响其甲基化测定准确性?怎么保存比较好?因为修饰以后的DNA不稳定,怕发生变化影响测定结果。但是现提现做又不方便。希望大家能够提些建议,另外有没有相关文献可以参照,我查了很久,都没有关于这方面的,谢谢大家。

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5个回答

首先,需要弄清楚你的模板是来源于淋巴细胞,还是来源于血清中的游离DNA?淋巴细胞中的DNA量很丰富,2ml全血就可以提出很大的一团,如果是血清游离DNA,量会比较少。
一般而言,你可以提取一批模板DNA,TE溶解分装后,-20保存,至少一年是可以的。我就直接放在4度冰箱,几个月是不会有问题的。
至于修饰,你可以把修饰后的产物直接按照你设计的MSP体系用量分装到各PCR管,用的时候直接拿出来P就行了,可以有效的防止反复冻融。

2024-04-04 01:16:55

抽提的血液,马上-20度冰冻,如果长期不抽,-80度保存。    

2024-04-04 01:20:07

我去年做了几个基因外周血(白细胞)DNA的甲基化,先说一下你外周血采集和保存的过程,抽提DNA的方法!如上提出要和游离肿瘤DNA区分!修饰的方法,这也会影响你保存的条件?手工or试剂盒?试剂盒的DNA保存液比较稳定,在-20度一般不会变化!

2024-04-04 01:25:57

BSP虽然是金标准,但是太花时间了。
HRM目前的机器还是比较少,多数得找人代做。
定量MSP蛮有料的,既快又准确。就是不知道具体的操作。也没有类似的相关材料    

2024-04-04 01:27:10

不妨试试焦磷酸测序

2024-04-04 01:27:53

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