2024-03-31 23:13:42

通常改变哪些色谱条件以改善峰型呢?

HPLC分析样品,峰出现拖尾,通常改变哪些色谱条件以改善峰型呢?

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采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形,该技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在;对弱碱,情况相反。分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。


2024-03-31 23:18:26

可能的原因有:

1、筛板阻塞(a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱)

2、色谱柱塌陷(填充色谱柱)

3、干扰峰(a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱)

4、流动相PH选择错误(调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰)

5、样品与填料表面的溶化点发生反应(a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b、换柱子)


2024-03-31 23:19:08

流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互作用,减轻或消除峰拖尾现象。所以在这种情况下有机胺(如三乙胺)又称为减尾剂或除尾剂。 

2024-03-31 23:19:39

适量添加三乙胺,柱层析时有时候也会出现类似情况

2024-04-01 08:53:47

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