1、我所用的嘌呤霉素是生工的,C6细胞是大鼠脑胶质瘤细胞系,请问筛选浓度有参考意见么? 2、使用嘌呤霉素筛选慢病毒稳转的细胞株,嘌呤霉素是在病毒转染3d后再加到培养基中还是病毒转染8h后加入?3、细胞系一般要传到第几代之后,细胞就可以用来做后续实验了?
按0.5ug/ul-3ug/ul梯度摸浓度,2感染48h即可,3传个2,3代肯定可以用了
用的时候检测一下稳转株数据是不是符合预期。
最终确定是不是稳转株,需要进行qpcr检测,看表达丰度是不是符合。