2018-12-05 19:56:59

慢病毒滴度低可能是什么原因?

慢病毒滴度低可能是什么原因?这些原因具体会怎么影响病毒滴度呢? 

我现在实验出现以下几种情况: 1、同一批细胞,相同的操作,不同的质粒进行包装,滴度测试差距很大。 原因应该是质粒不同,但是质粒是怎么具体影响滴度的?怎么优化条件?2、相同的病毒,转染不同的临床病人,转染率差距很大。  原因可能有两个:一是慢病毒保存不当,这种因素应该很小,因为一直在-80℃保存,期间没有反复冻融 二是病人体质不同,经过化疗或者服用其他药物影响自身细胞,关键是怎么影响滴度?3、细胞代数影响:一般应用多少代后,细胞产病毒能力降低?有没有人做过专门的实验(我本来在做,实验室仪器坏了,但是慢病毒的生产不能停止)? 请教包装病毒的大神,有什么心得   

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细胞生物学×

3个回答

影响转染效率的是质粒的质量和细胞状态以及操作和试剂,影响滴度的是转染效率和细胞状态以及回收方式,感染差距较大,病人的T细胞状态不同。细胞一般传代40几次就不用了,我们这边是这样的。 

2018-12-05 19:58:15

1. 不同质粒包装出来的滴度有差别正常,最大的影响因素是质粒大小,太大的质粒滴度就很低了。另外质粒本身的原件结构也有影响。2. 这个原因很多,不知道你们是直接在体转染还是离体转染细胞,应该是离体吧,这样的话细胞本身的状态对转染影响很大。 

2018-12-05 19:59:23

传太多代确实会有影响,但是通常来说半年之内应该看不出太大区别。 

2018-12-05 20:36:23

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