2018-02-13 15:15:03

双色荧光标记LC3瞬转会影响胞内自噬水平么?

最近准备使用腺病毒包装的mRFP-GFP-LC3来观察自噬,跟同学一直在探讨的问题就是,这样瞬转,并且无法整合到基因组内的方法,是否就相当于LC3人为的过表达?那还可以真实反映出胞内的自噬水平么?
望各位大神解答 

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凋亡坏死与自噬×

3个回答

其实很简单 自噬过程LC3剪切 mRFP-GFP-LC3就是模拟一个底物而已,基本能反应的 

2018-02-13 15:16:07

 就算有外源的LC3掺入也不会影响自噬水平 

2018-02-13 15:23:32

双荧光指示体系:汉恒生物已开发出用于表达mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的病毒产品。作用原理:mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 我们在显微镜成像后红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是自噬体。红色的斑点指示自噬溶酶体,通过不同颜色斑点的计数可以清晰的看出自噬流的强弱。

http://www.hanbio.net/cn/products/item/28 

2018-02-13 15:29:15

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