做凋亡相关蛋白的检测，为什么高浓度药物组趋势出现问题啊？

我的实验是一种药物对肿瘤细胞凋亡作用的研究，现在做几个凋亡蛋白。药物的24小时IC50是8.5umol/L，所有设置了5、10、20umol/L这三个浓度梯度，作用24H后收集细胞蛋白。但做PARP前体蛋白测定中， 0、5、10这三组有下降的趋势，但20组又升高了。这个怎么解释啊？已经做了好几次。

生物化学药理学药物化学

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好几次都是这样吗？我来看的话，我会认为你的药物的作用时间可能并不需要24h，低浓度下细胞的响应慢一下，24h后结果是符合预期的，高浓度时细胞的凋亡过程可能已经到了尾声，一些蛋白的表达出现了反馈调节，建议可以把药物的作用时间剪短一些，或者做个时间梯度也未尝不可。

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2024-03-17 12:49:05

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我觉得你在4小时的节点做这个实验的话效果肯定好一些。凋亡蛋白的药物孵育时间和IC50的不一定需要一样，我见过一些文献里面两者的孵育时间是不一样的。

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2024-03-17 13:01:20

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加个内参对照一下，看细胞总量是不是同一水平。

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2024-03-17 13:05:35

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