某个基因沉默后肿瘤细胞凋亡显著,构建不了干扰地稳转株细胞。就构建了过表与过表达对照的稳定株肿瘤细胞,但是过表达该基因的肿瘤细胞增殖速率低于对照细胞。请教各位大神给点意见,往哪方面考虑比较好呢?谢谢~
改用TET-on系统。这个是必须的,如果投好杂志。我们有两个用于基因敲减的,一个是TET-plko-puro,另外一个是增强型的TET-miR-shRNA系统,都是慢病毒系统,效果都可以。
通常做肿瘤细胞,最终都是要成瘤实验的,所以,我建议一开始设计时候就要考虑诱导型的。很多新进入实验室的研究生,往往把大好的时间和经费都花费在不很准确的设计上,然后冲劲就没有了。
常规转染手段都对细胞有毒性的,所以转染率低,请更换转染技术。推荐xfect