2017-06-05 10:09:41

CCK-8药物的浓度如何控制?

各位大神,本人实验小白,是抗肿瘤药物处理hela细胞之后做CCK,有几个问题:1,是不是实验之前细胞都需要做标准曲线。2,标准曲线的作用仅仅就是摸索种板细胞数吗,还是有别的作用,如果种板细胞数文献很成熟,是否可以不做,外文投稿时会不会有要求。3,药物的浓度怎么控制,应该是在半数致死量附近选择浓度吧,要不要画出剂量反应曲线。如果文献上不清楚,大家都是怎么选择浓度范围的啊。
多谢!


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肿瘤与细胞×

3个回答

 1. 不用都做标准曲线。2. 如果你已经知道接种数的话,可以不做,这个投稿没有要求。3. 做CCK-8时,要做一个浓度梯度。你可以将药物进行梯度稀释,检测不同浓度处理后细胞的活力,据此做出一个曲线,用相应的软件计算IC50。


2017-06-05 10:11:35

这个可以的。另外,对于一个新的化合物来说,可以考虑用等比稀释的梯度,这样涵盖的范围会比较大。比如以下这个梯度(uM),设置的最大浓度是100uM(更大的浓度没有必要,因为对于一个好的化合物来说,它的IC50在uM级别,最好是nM级别),最小浓度是0.046uM,涵盖的范围已经很广了,足够进行实验计算IC50。
100.000 33.333 11.111 3.704 1.235 0.412 0.137 0.046


2017-06-05 10:12:01

个人觉得种板的细胞数应该根据最终OD值的范围自己摸索把,我们一般把所测的对照组的OD值确定在1~2左右时的细胞数最好。
药物作用浓度范围如果众说纷纭,你可以自己做个大范围的预实验,比如设置100, 10,1, 0.1,0.01这样的浓度,然后求得IC50的值,以IC50值作为中浓度,再确定最终作用浓度。


2017-06-05 10:12:23

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