2024-03-03 13:28:00

神经细胞水平怎么和疼痛关联起来?

请路过的各位大神解答一下,我所在的实验室前期在体水平很简单地证明了某蛋白质与痛觉有关,现在我要反过来证明这个蛋白质越多大鼠越疼,但是我要做细胞水平的,然后利用转染技术让某种蛋白质低表达或者过表达,我现在没办法在细胞水平说明这个蛋白质参与了痛觉产生?我做Western ,免疫荧光这些其实也就是验证细胞成功转染罢了,我怎么和疼痛扯上关系呢?谢谢解答。在体水平不容易转染成功,考虑做细胞水平。


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神经生物学×

2个回答

这蛋白的表达位置是哪里?如果是外周神经元,电生理膜片钳记录外周神经元,比如DRG,细胞兴奋性。如果是中枢,大脑没有专门的痛觉感受区域,所以记脑片,哪儿高表达记哪儿


2024-03-03 13:28:22

第一,在体你通过何种方式证明该蛋白A与pain相关的?你单纯的转染该蛋白是无法直接与pain关联上。第二,建议:通过疼痛模型,建立之后提取组织蛋白,看表达量是否提高,DRG或者spinal cord水平均可,看你发现的蛋白在哪里表达。第三,通过在体knock down实验,进一步确认大鼠痛觉缺失与否。第四,做转基因大鼠,体内敲除确认结论。


2024-03-03 13:28:42

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