2021-11-30 23:09:57

CCK8法测细胞活性如何加?

想用CCK8测细胞活性,是每孔加10ul么,不需要稀释么,如果要稀释,那稀释成百分之多少呢,说明书是加10ul,有的文献说不用吸走含药物的培养液,有的又说吸走,然后用培养液去稀释,想请教这方面的大神,在此先谢过了!


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细胞生物学×

3个回答

是否需要吸走原培养基应该视药物是否对CCK8试剂有影响,保险起见可以先换正常培养基(96孔90ul),再加CCK8原液10u,即稀释10倍,然后放置1h(时间根据战友需要)左右上机检测即可。


2021-11-30 23:10:32

个人经验:1. 先按照需要将计算好的CCK-8加入到培养液中,混匀备用。例如20孔,将200uL的CCK-8和1.8mL的培养液混合均匀,可以适当多配出一份;2. 吸出原来含有药物的培养液;3. 将上述CCK-8溶液加入至96孔板中。孵育1-4小时后测量。这样的好处是:减少了药物对CCK-8之间可能的影响;避免了直接加入CCK-8后可能混合不均匀造成的反应不一致;减少了孔与孔间培养液体积的不一致,由于96孔板周边的孔挥发很快,长时间培养后与内部的孔间培养液体积差别较大。


2021-11-30 23:11:03

我们是这么做的。加cck-8是最后一步,如果孔里有200uL液体,就吸走100,再加10uL cck。 如果孔里只有100uL,就直接加cck8即可。最后总体系是110uL。贴壁细胞也可以这样加。先根据需要体积(每孔100uL不含胎牛培养液+10uL CCK8,总计110uL)稀释好cck8,然后把每个孔里的液体均吸出来,再补110uL。


2021-11-30 23:11:22

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