做细胞的凋亡与坏死,准备用annexin v PI 双染测细胞凋亡,实验设计是去不同时间段的细胞去上流式。因为不同时间取样一个一个做太麻烦,单位流式比较忙,不好预定。请教各位大神,不知能不能不同时间取样后,先用多聚甲醛或其它乙醇固定后,最后收集完样品一同上流式呢?因为以前做别的实验,淋巴细胞用多聚甲醛固定1周以内,上流式都是可以的,不知做凋亡可以不?
多聚甲醛固定好后放4°一星期应该是没问题的
可以,固定后四度过夜
凋亡染色不要固定。固定后PI能穿过细胞膜。而凋亡早期的膜虽然annexin v外翻,但PI不能透过。