大家好,我之前用人工合成的3'UTR含有miRNA binding site的一段来做荧光素酶实验,然后reviewer要求用endougeous的3'UTR重复一下。我现在打算做3'RACE. 长度大概为1600多bp,请问这个长度拿来构建荧光素酶载体可行么。此外,怎样合成3‘UTR中含有结合位点的某一段序列呢,也是通过RACE么?但是RACE时得到全长。做全长担心不好做。请指教,谢谢
可行。如果要合成3‘UTR中含有结合位点的某一段,可以在合成引物时带上该序列。RACE全长是不太好做,但是现在kit已经比较成熟了。
一般也不用做race吧 2kb足够,不用RACE吧 序列你难道查不到?不用全部utr的 包含靶序列300左右足够了吧。这reviewer够流氓的