2024-05-25 07:12:14

培养胚胎干细胞时抑制分化的措施大家怎么看?

1.关于胚胎干细胞培养, 为使其增殖而不分化, 一般要在饲养层细胞上培养, 但小鼠的胚胎干细胞可以通过加LIF 到培养基中来抑制其分化.
2.但是有的观点认为: LIF只可以促进胚胎干细胞增殖, 如需要抑制其分化, 还需要在饲养层细胞上培养!
3. 我个人实验中: 养小鼠胚胎干细胞只加LIF, 不用饲养层, 足够!

大家对此怎么看?


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3个回答

胚胎干细胞(人)保持自我更新能力的最重要的因素之一就是饲养层,个人在培养过程中发现如果饲养层细胞的处理的不好,比如密度不对,或者是批间差异较大,势必会引起细胞的分化,具体体现是克隆增殖力下降,细胞形态各异,最麻烦的是传代时克隆分割困难,如果细胞较多,往往导致没有耐心了。如果下批feeder较好,还可以挽救一部分克隆,但是如果不好,则是致命的打击。
人的胚胎干细胞对lif的反应不敏感,所以不加也可,节约吗!


2024-05-25 07:12:36

是不是需要feeder取决于细胞本身,不同的系要求是不同的。
相关的paper很多。
有的不需要feeder的ES可以在MEF上培养,
可是需要MEF的ES就不能撤去MEF.

 


2024-05-25 07:12:58

ES细胞的无饲养层培养时,应加条件培养基来维持未分化,目前大部分条件培养基来源于饲养层的上清;而且同时应使用Marigel等细胞外基质促进细胞帖壁和增殖


2024-05-25 07:13:17

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