2024-03-07 22:09:58

标准品出峰,加在血清样品里经提取处理后不出峰,是什么原因?

我把标准溶解在溶剂里经HPLC-UV可以跑出来,但是准备制作标准曲线的时候,把标准品加在血清里经乙醇去蛋白,正已烷提取后测定,跑不出峰来,是怎么回事呢?我是按参考文献来的,我测的是25(OH)D,文献都是乙醇去蛋白,正已烷提取的。就是找不到原因,我也觉得是提取的问题,因为提取后再加入标准就能跑出来。


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药物化学×

3个回答

标准品可能与蛋白结合共沉淀或正己烷萃取效率本身就不好啊。


2024-03-07 22:10:22


Vit.D-25(OH)与蛋白结合了,你再用乙醇沉淀蛋白,当然没法提取出来了,脂溶性维生素加乙醇沉淀时也未必能够溶解Vd,另外蛋白结合的药物加有机溶剂沉淀蛋白时,需要少量分次加入,避免蛋白一下析出包裹药物降低提取效率;还有一点,乙醇如果溶解了Vd,还能用其他有机溶剂萃取出来吗?能否萃取,关键是看两相对Vd的分配系数,研究一下吧。

可行的办法是不沉淀蛋白,直接用有机溶剂提取,一样是分次加入,每次都涡旋。中文文献不靠谱的多,别太依赖。


2024-03-07 22:10:47

是否可以换纯甲醇试一下,再萃取是否出峰,总感觉用乙醇总觉得沉不干净,离心时间再加长一点。


2024-03-07 22:11:06

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