2018-12-05 20:47:19

发酵液含有提取蛋白和糖类物质,怎么提取?

对于很多物质我们可以对原料进行水提醇沉这一经典方法,效果不错。但是对于发酵液的处理却碰到了困难,由于发酵液中含有高浓度的单糖、寡糖还有氨基酸和小肽类物质,粘度特别大。发酵液用60%,80%的乙醇沉淀,并静止过夜,发现底部有大量淤泥一样的沉淀,用水浴干燥沉淀,无论如何无法干燥。将发酵液稀释,用60%,80%的乙醇沉淀,发现沉淀析出的很好,抽滤后用丙酮洗,很容易干燥,得到目标糖蛋白。将发酵液稀释以后产率大大下降,只有1-2%。也尝试用透析的方法先把小分子物质去掉然后60%,80%的乙醇沉淀,效果也可以。但是实验室的透析袋容量都不大,不利于富集样品,效率低下。


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药物化学×

3个回答

既然作为粗品,是否可以不干燥,直接冷冻保存,测试和柱层析时拿出来用即可.毕竟你的目的是研究,还不是生产。


2018-12-05 23:57:54

从你的操作中看,发酵液醇沉后并未对沉淀做进一步的纯化。那么你可以直接对沉淀进行干燥啊。在实验室规模下简单的做法是将离心去上清的沉淀用无水乙醇进一步脱水2-3次后,置真空干燥器中真空干燥即可。如感干燥力度不够,还可在乙醇脱水后加一步丙酮脱水。


2018-12-05 23:59:22

糖蛋白分子量在10000以上,而单糖、寡糖、氨基酸等小分子分子量均在10000以下,建议你先用水使发酵液稀释,然后再进行超滤,效果不错。

 

 


2018-12-05 23:59:41

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