2019-07-10 13:11:01

多肽难溶,欲加DMSO等溶解,又怕对小鼠有毒

合成多肽免疫动物,多肽难溶,想加DMSO等溶解,又怕对小鼠有毒,怎么办?


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1 、溶解性是使用多肽时比较重要的问题。每个氨基酸都有其固有化学特性。如亮氨酸Leu、异亮氨酸Ile、颉氨酸Val是疏水性的,其他氨基酸如赖氨酸Lys、组氨酸His、精氨酸Arg是亲水性的。因此不同的多肽因其组成不同而具有不同的溶解性。
(备注:在多肽溶解之前,建议先用少量肽来试验最适溶解方法,只有当多肽完全溶解后,才能加入水或缓冲液将之稀释至最终浓度)
2、一般情况下,多肽首先选择溶解在灭菌的蒸馏水或去离子水中。如果这个肽是不溶于水的,且其是酸性的,加入温和的碱如0.1%的NH4OH能够增加肽的溶解度。相反,对于碱性的肽,温和的酸如0.1%的醋酸或TFA(三氟乙酸)能够帮助多肽溶解。
3、在一些情况下,某些肽具有很高的疏水性时,不易溶解,可以用少量的DMF或DMSO帮助其溶解,这时推荐将多肽溶解于高浓度,然后用水或缓冲液将其稀释到正常的工作浓度。因为盐会导致疏水性多肽的聚合,所以必须在多肽完全溶解后加入缓冲液进一步稀释。当遇到这种情况时,注意以下几点说明:
(1)DMF或DMSO的使用有助于多肽的溶解,这是通过破坏多肽的二级结构而助溶。
(2)这种试剂的使用可能会对其生物活性及后续的研究工作造成干扰,请在溶解考虑到这个问题。
4.对于一些在弱酸、弱碱及有机溶剂中均不能很好溶解的多肽,可以尝试超声波处理,超声有助于打碎颗粒增加肽在水中的溶解度。但在使用超声处理请注意: 超声会引起溶液发热从而造成多肽降解,所以必须在冰上操作!

2019-07-10 15:20:03

多肽难溶可以用弱酸弱碱调一下PH值, 实在不行,用DMSO溶也没什么问题,但最好能保证DMSO的体积不超过终体积的30%。


2019-07-10 15:29:26

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