可以瞬转，但是需要将新导入的蛋白质同内源性蛋白质区分开来，例如，新导入的蛋白质带３XMYC标签。将新导入的蛋白质与shRNA共同瞬转，用针对内源性蛋白的抗体做Western。证明内源性蛋白降低，新导入的蛋白质表达。

不只是加标签的问题，　一般要在ＷＴ表达载体上结合shRNA的识别位点进行无意突变，防止ｒｅｓｃｕｅ的mRNA 被shRNA识别并降解　

当然做是最好了 一般可以不做
做的话 按我的经验
shRNA选UTR靶点的 这样rescue后 就不需要做突变了
（如果shRNA靶点在CDS区，做rescue就需要突变对应的靶区）

这个rescue实验看什么，如果只是针对sh A的话，你需要狗年一个不能sh a靶向的突变体，如果a靶向utr区域，可直接转入cds的正常表达载体，如果a靶向cds，那需要构建不能sha靶向的突变，这个设计引物做就可以。还有一张rescue是针对a下游的某个蛋白b，这个蛋白就是本课题所涉及的信号通路，那直接可以构建b过表达或敲出稳定细胞系，然后根据你的前期实验，瞬时oe/kd a即可。