2018-11-11 15:09:21

RAW264.7细胞养死了,养着养着就浮起来?

RAW264.7细胞养死了,养着养着就浮起来,我用的DMEM高糖,会不会是培养基的的问题,各位用的是DMEM高糖么?

换液时,我用Pbs洗2遍,会不会有影响啊 ?


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5个回答

264.7长的很快,需要及时更换培养基,密度高时会有部分飘起来

2018-11-11 15:19:55

RAW264.7就是用高糖DMEM养的,加10%血清,大多数人用FBS,我用的是新生牛(NCS),养的也还可以,我倒不会出现细胞浮起来,就是会分化,伸出伪足,变形。你是用什么养的?瓶还是皿?用胰酶消化吗


2018-11-11 15:22:02

 DMEM高糖是可以的啊,如果镜下细胞融合度高,同时飘,要考虑接触抑制、废物堆积所致。如果是细胞少,状态不佳,同时还飘,就要逐步排查污染


2018-11-11 15:23:30

RAW264.7细胞培养时需要注意手法,要非常轻柔,我们都不用胰酶消化,直接吹打的,这个过程中手法和力道很重要。正常情况下,该细胞呈椭圆形,无触角,贴壁生长。生长速度较快,2天左右即传代。
个人感觉和培养基关系不太大,我们用MEM,1640 或者DMEM都养过,都不错。


2018-11-11 15:24:17

感觉跟培养基关系不大,是不是血清的问题或是你的细胞冻存之前已有问题。

2018-11-11 15:25:01

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