加好分离胶,加好水之后,等待胶凝,上部先出现分层,下部的胶却坑坑洼洼,凹凸不平的样子,是什么原因?
玻璃板上有杂物,而且有可能两块胶版没有对齐
以前也碰到过,个人感觉是胶没有混匀
我当年曾遇到这问题,排除各个环节后发现是因为实验室温度太低,将空调温度调到28度试一下。
以上朋友的建议都是正确的思路。
个人觉得wb配胶和转膜之前制作三明治的步骤都必须注重细节!尤其配胶,如果胶不均匀你的蛋白在里面跑的路不平速度也就不一样,条带必然不齐!所以从洗玻璃板开始就需要注意了,配好的液体最后加催化剂之前要混匀,而且不要有气泡,加之后也要混匀一下。缓慢加,注意气泡,每次可以不把枪里的液体都打完!温度低胶可能凝得时间稍微长一点,但是一般不太影响!祝好运!
我们是用的异丙醇,还不错,挺平的