2022-05-24 08:48:14

只检测磷酸化Akt,不检测总Akt可以吗?

最近一篇jbc文献只检测磷酸化(ser-43)Akt,而不检测总Akt,(另外作者也检测了anti-phospho-GSK3ß表达,以及PI3K抑制剂),是否提示:此种情况已经被认可。


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细胞生物学×

2个回答

只有磷酸化的AKT才起到信号传导的作用,检测活化的AKT当然有意义了。而切更有说服力。一般情况下,当由于某种因素存在而引起活化的AKT增多时,总的AKT也会增多。所以两个都检测更好,检测其中一个也有意义。PKC也是这样,一些细胞因子存在这样的问题,象EGFR等,也存在活化和总量的问题。无论你检测哪一个,都有意义。但一般活化的检测比总量的检测方法更加复杂一些,象PKC活性的检测,相对较复杂,而总量用免疫组化就可以大概判断。


2022-05-24 08:58:42

如果是总的Akt有变化,那么就涉及转录表达调节或者降解方面的问题了。一般说来,瞬时的信号转导通过修饰等途径改变激酶的活性从而影响下游分子,而蛋白水平的变化属于相对长期的改变,所以首先考虑活性的改变但我觉得同时检测总Akt是比较规范的做法,至少这相当于一个内参。或者,之前的实验或前人有报道过这样处理不会改变Akt水平,所以作者省略了。


2022-05-24 09:03:45

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