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2017-10-27 02:48:49

如何解决WB拖尾问题？

WB电泳老是有拖尾，影响100KD以上蛋白，基本没显影显出来过。100KD以下影响较小，如果拖尾严重，甚至内参显影都减弱明显。用超声，离心后再取上样，还是不能去除。原因是细胞裂解离心后吸取的上清液过多，有沉淀一起吸入（肉眼观察还是没有沉淀一起进来）？还是煮沸有问题?95° 5min。有没有人也遇到这样的问题，解决的方案是？

细胞生物学免疫学

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我做组织蛋白也遇到这种问题，不知道是不是提组织过程中，组织蛋白降解还是杂质除不掉

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2017-10-27 03:42:25

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细胞样本的话是残存血清的原因，其次是制胶的原因，另外上样过多或者上样时候吸取的不全是上清也会造成

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2017-10-27 04:02:16

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可能是脂肪组织飘在上样液中没有去除，密度比较低，点样的时候吸到脂肪。不知道有没有办法去除

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2017-10-27 04:52:44

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提问时间：	2017-10-27
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