HPLC出峰时间突然延后，找不到原因，寻求大家帮助。

条件都摸好了，昨天进样的时候还是正常的，今天还是同样的条件，结果出峰时间几乎都延后了，有个峰又重在一起了(本来是差不多分开了的)，求教怎么回事？

有机化学药物化学

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出现这样的情况，原因其实很多：

1.你所说的条件摸好是指什么，如果是以某一次能分开为标准的话，下次不能有效分离的可能性较大

2.色谱条件是否良好，是需要经过验证的，否则，连自己都有可能无法重现

3.如果是经过验证了，那么也有可能出现问题：

1）液相系统问题：比如比例阀出现问题

2）色谱柱问题：柱效下降导致分离度变差

3）操作问题：比如流动相问题，平衡时间太短，漏液等

4.还有其他可能，我这里就不一一说了，主要根据的情况，进行分析，一般都能找到原因。

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2024-03-07 11:31:30

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1.流动相配制问题：有机相的比例；pH值是否准确（楼主提到有几个本来分开的峰分不开了），建议校正pH电极，并重新配流动相

2.液相系统：是否有漏液，压力是否稳定（单向阀气泡），温度，柱效等等

3.样品会不会有变化，比如降解。

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2024-03-07 11:35:25

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温度不一样也可能导致后移，要开空调呀。

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2024-03-07 12:07:19

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