LH-20对于多羟基化合物如多酚，黄酮效果特别好，这是因为羟基容易和葡聚糖形成氢键。另外，由于不同比例的氯仿－甲醇有着不同的极性，用LH－20柱层析时利用其在LH－20表面和溶剂的分配达到分离目的，楼主分离的不好，可能是比例选择不合适。LH－20也可以用于分子筛，完全依靠分子量大小进行分离，这需要很长的柱子。所以LH－20有着三种不同的分离模式，而且常常这三种模式都同时起作用，仔细选择洗脱剂和柱长，很多物质都可以分的很好。按照《Preparative Gel Chromatography on Sephadex LH-20》的作者德国人Hans Henke的话来说，没有什么是LH－20分离不了的，当然，他用串联4根2m的柱子来做分离，有点极端了。

用硅胶H（目数细一点）装根干柱分吧，当然对技术要求比较高，然后用你的展开剂进行洗脱，然后分段挖出，甲醇分别洗脱，最后重新分别结晶试试。实在不行就烦琐点刮制备板吧。

凝胶的使用：一般用甲醇-氯仿效果都不是很好；使用时候要看化合物类型，不是看人家用凝胶你就用凝胶。很多类型化合物凝胶效果都不理想。象多羟基酚类（如黄酮，马兜铃内酰胺类）一般会有较好分离效果。像一般萜类，分离效果就不怎么如意。个人经验

以氯仿：甲醇=9：0.5展开，Rf值相差0.1 以上？应该可以分开，实在不行将极性再调低一点。