压力过高原因主要有以下：

１.流速过快

２.色谱柱堵塞

３.使用黏度高的流动相

４.压力传感器损坏

５.流路堵塞

1.3.4可以排除，我想一定是管道堵了吧，以前的缓冲盐没有冲洗干净，都沉积下来，导致管道局部流通不畅，压力偏高．

建议：60度左右的热水冲洗１hr．再换有机相低流速冲洗一夜。

以前遇到过类似的情况，原因是柱子前端的筛板脏了，卸下来用甲醇或异丙醇超一下就好了。

我的建议如下：

1.把柱子连接检测器的一端断开，甲醇冲洗，用量筒测量流速，如果没有问题，柱子及泵系统没有堵塞！

2.如果流速不足，前段则有堵塞，依次用浓硝酸、水、甲醇超声，充分洗掉流在泵中的缓冲盐

3.如果你仍然不能断定柱子及系统是否堵塞，试试把柱子反过来接上

以上仅就你所说情况的分析，如果你还没有解决问题，可以把问题说的更详细一些，我们共同探讨！

1 水过渡一下。

2 最好把单向阀拆下用甲醇超个一个小时啊。

3 如有必要可以用5%硝酸清洗管路。

“堵”的表现现象就是柱压异常升高，直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端，最主要原因就是流动相里有杂质，杂质的主要来源就是细菌。