做原核表达，怎么菌不长？

做原核表达，将含有重组质粒的Rosetta菌划平板（含抗生素）过夜，次日接到LB培养基（含抗生素）中，怎么没见长呢？？请教高手能予指点，多谢！！

分子生物学

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我也遇到过类似的情况，当时怀疑是噬菌体污染，可以采用连续划平板传代的方法得到较纯的单克隆菌落，然后再挑取单菌落至液体培养基中，一般要传５代以上。我们就是用这种方法解决的，当时也走了很多弯路，耽误了很长时间。希望能对你有所帮助

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2024-04-09 14:25:57

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我觉得要分析下，有没有确定你的rosetta菌含有你转入的质粒啊？或者你的菌有没有污染，使的你刚好挑的是杂菌呢？这些都要考虑全面才能知道是什么问题。建议你重新鉴定你的菌，然后取一点去摇，摇起来后再去涂板挑单菌落。这样下来一般都不会错了。当然要注意你的抗生素不要失效，浓度要足够！

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2024-04-09 16:03:00

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我有次也是这样平板长了,但挑入液体培养基中8小时内未长,24小时再观察时,发现又长菌了.我用此菌做了诱导表达蛋白,电泳中,通过未诱导与诱导的对比可以看出得到目的蛋白.重复挑菌培养诱导,结果仍是这样,此菌生长太慢了

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2024-04-09 16:48:00

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平板放时间太长了吧

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2024-04-09 16:50:13

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培养基水分失去太严重了,所以不利于微生物生长

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2024-04-09 17:53:57

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