想做一个230kD的细胞膜蛋白,选用的是6%的胶,跑到最后需要几乎70的MARKER在胶的最底部了,如果要在同一张胶片中同时显出内参,请问应该选择何种内参?分子量为多大?ACTIN,TUBLIN,GAPDH都不可用。
你可以试试p130,不过我不确定,我也在找内参,我的目的蛋白180KD左右,也是6%的gel。
用CFAS PAGE吧,类似于梯度胶,250-10kd 都可以在一块胶上完成
我跑过一个250kda的蛋白,最开始也是用6%的gel,gel 配的是浓度梯度,下面先配10%的,然后配6%的,再配浓缩胶,不过效果不好。后来整个分离胶改为8%的gel,内参用的是Actin,效果还将就。个人觉得,你230的蛋白,8%的肯定可以跑,你直接在marker 130kda以上全部把胶切下来。祝你好运