SMCC 一头是NHS一头是-SH，KLH上有NH2-要用掉NHS-，楼主的抗原不一定带-SH，所以不能用SMCC，SMCC一般用在含Cystein（-SH）的多肽和KLH偶联，不过PIERCE也是有2头氨基偶联的linker，戊二醛么也可以试试，毕竟这个便宜。btw：KLH有部分分子比你这个10000道尔顿的抗原还要大

如果没直接的可参考别的蛋白偶连的文献,或发到免疫版问问.也可看看免疫实验书中抗原制备.

分子量大于10kD的蛋白质理论上都具有一定的免疫原性，不需要载体蛋白的偶联。KLH分子量非常大，可偶联的活性基团也多，通常作为载体蛋白，用于偶联多肽，制备抗体。像你这种抗原，直接免疫应该没有问题，如果抗体效价不高，可以尝试多种的注射方法（皮下多点注射、肌肉注射、淋巴结注射等等）混合免疫，以提高免疫效果。

KLH水溶性不好吧！分子量太大了，不过还是溶解在PBS中比较好。楼主你这样直接用戊二醛偶联因为没有专一性，蛋白之间任意偶联，会形成多种产物，必须得过柱。建议先将蛋白修饰一下再偶联，可以考虑用SMCC。

KLH的水溶性非常好，完全可以用水溶解，但建议溶解后一次使用完，如有剩余可以分装后置于-80度冰箱中。建议用SMCC效果很好。

KLH容于PBS就可以，本身是大分子蛋白杂和，水溶性非常好，戊二醛估计也可以用，不过最好还是用分子量长一点的link，这样免疫效果会好一点