2024-04-22 01:15:05
多肽类药物在液相上的分离度和拖尾因子?请教一下大家:我现在用的HPLC洗脱方法走出来的图谱,主峰在8min出来,但是分离度总是0.95左右,摸索过了四种洗脱方法,主峰洗脱出来的时间从8min到20多min都试过了,但是分离度最大不超过1.0X。而且拖尾因子也比较大2.2X左右。我用的样品的纯度已经达到了99.4%左右,紧挨着主峰的附近有两个含量很小的杂质峰,但是分离度根本达不到药典规定的分离度>1.5的要求,想请教一下大家几个问题: 1、想增加分离度需要改进那些地方?我用的是水-乙腈再加上TFA作为流动相走梯度洗脱样品的; 2、因为药典上是对化药规定的分离度要大于1.5,对于多肽类药物的话这个适用么? 3、如果想提高分离度,减小拖尾因子需要采取哪些方法? 4、有对多肽、蛋白类药物的HPLC检测的一些参数(例如分离度、拖尾因子、纯度角、纯度阈值)等研究的文献么?我百度查到的都是对蛋白分离纯化大范围的概述,没有比较细的研究。 希望能得到大家的指导,谢谢! |
我也做过类似的分析,如果这种流动相体系分不开的话,基本不用再试了,无论怎么把梯度调缓也不可能分开,即使把你看到的分不开的杂质分出来,还会有新的分不开杂质出来,多肽就是这样.你可以多尝试几种缓冲盐。 |
提问时间: | 2024-04-22 |
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