2019-01-23 16:06:33

creb的条带极微弱,p-creb的没有条带,不知道该怎样改进条件?

哪位有做过creb和p-creb,自己最近在做,一二抗的浓度都是1:500,cell signal的抗体,分离胶10% 浓缩胶4%,电泳80V 20min,100V 60min,转膜300mA 60min, 结果是:creb的条带极微弱,p-creb的没有条带,不知道该怎样改进条件? 谢谢大家踊跃帮忙 creb和p-creb的分子量是43kd

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1个回答

首先,应该明确你的蛋白有没有问题,加没有加磷酸酶抑制剂?提取的时候是否注意低温操作?另外上样量是否够?抗体是先孵creb,洗脱液洗完后再孵的p-creb?还是分开孵的?延长抗体孵育时间。

2019-01-23 16:27:39

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