希望这个对你有用：以Invitrogen的Lipofectamine 2000为例，需要注意以下几点：1、DNA的量：Lipofectamine 2000=1：2~3。2、细胞密度大约占培养板的80%左右，转染。3、转染期间不要加抗生素，否则会导致细胞死亡。步骤如下：以24孔培养板为例：1、转染前一天细胞换新的培养基2、制备DNA-Lipofectamine 2000复合物，如下:a、用50ul无血清培养基稀释DNA（0.8g），轻轻混匀；b、Lipofectamine 2000使用前，轻轻混匀，用48ul无血清培养基稀释2ul Lipofectamine 2000，轻轻混匀，室温孵育5分钟；c、将a+b的液体加在一起，轻轻混匀，室温孵育20分钟，使DNA-Lipofectamine 2000复合物形成；3、将100ul DNA-Lipofectamine 2000复合物加入培养板中，轻轻前后摇匀；4、放入37度孵箱中培养24~48h后，1：10传代，加入G418筛选。加入G418的量最好设几个梯度或者转染前做MTT，找好G418对你所转细胞致死量的浓度。5、等细胞在G418作用下，长满后冻存几支（保种）。再克隆化培养：将细胞消化后计数50个细胞，加入22ml完全培养基中，混匀，分装在96孔板中（200ul/孔）。第二天在显微镜下，寻找孔中有单个细胞的孔并做标记，等做标记的孔长满后，消化、转移到4孔或6孔培养板中，最后转移到培养瓶中培养，冻存，鉴定。6、鉴定成功后，建议马上做后续实验，因为在培养过程或冻存中，转进去的基因容易从细胞中掉下来。 

 额，我们实验室之前一直用的是lip2000，后来不怎什么时候，在冰箱里看到了一支诺唯赞的，就试了一下，转染效率很高啊，后来就一直在用了。具体的操作方法是按照他们的说明书来的，大致如下： A.细胞接种：转染前24小时左右对细胞进行转接，接种密度约为0.3～1 × 105 cells/well。过夜培养。B.ExFect® /DNA复合物包装 (该步完成后应立即转染)：  在1.5 ml无菌离心管中加入50 μl无血清培养基，并添加适量的转染试剂(2～5 μl/μg DNA, 参见表 一)。c 用移液器轻轻混匀后在室温静置5～10分钟。 在1.5 ml无菌离心管中加入50 μl无血清培养基，并添加适量的DNA (0.8～1 μg DNA/孔, 参见表一)。用 移液器轻轻混匀后在室温静置5～10分钟。 将ExFect® -培养基混合物滴加至DNA-培养基混合物中，用移液器轻轻混匀后在室温静置15～20 分钟后，立即转染。注意：ExFect®-培养基混合物和DNA-培养基混合物的混合次序非常重要，切勿 颠倒。 转染 注意：ExFect®在完全培养基中(基础培养基中添加血清)具有最高的转染效率，因此转染前后不需要 换成无血清培养基。 C.转染1.如特殊情况，可在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、 营养不足导致的细胞死亡。 将步骤B制备的复合物滴加至培养基中。轻轻晃动培养皿以使复合物均匀分布。 过夜培养24～48小时。 注意：如果转染后需要更换新鲜培养基，请于加入ExFect® /DNA复合物12～24小时后进行。培养基更换后，孵育24～48小时后再进行后续试验。收获细胞，进行后续实验。注意事项： 因细胞密度随细胞系不同会有很大差别，且细胞密度直接决定转染效率。因此请在转染过程中尽量 保持同样的接种比例，以提高转染重复性。多数哺乳动物细胞应在37℃、5% CO2条件下培养。其他的一些细胞系，例如昆虫细胞，需要在不 同的温度和CO2浓度下进行培养。请根据具体细胞系选择最适培养条件。应避免包装反应体系中存在血清，因血清会干扰ExFect®与DNA形成复合物。 如果转染DNA量较大或者当复合物包装时反应体系中出现沉淀，请将包装反应体系调整至1 ml进行。 

自己搜的一些Lipofectamine 2000的材料，能指导试验步骤的，分贴壁细胞和悬浮细胞，给出来转染量度标准和优化转染指导，你可以看一看的。 

希望这个对你有用：以Invitrogen的Lipofectamine 2000为例，需要注意以下几点：1、DNA的量：Lipofectamine 2000=1：2~3。2、细胞密度大约占培养板的80%左右，转染。3、转染期间不要加抗生素，否则会导致细胞死亡。步骤如下：以24孔培养板为例：1、转染前一天细胞换新的培养基2、制备DNA-Lipofectamine 2000复合物，如下:a、用50ul无血清培养基稀释DNA（0.8g），轻轻混匀；b、Lipofectamine 2000使用前，轻轻混匀，用48ul无血清培养基稀释2ul Lipofectamine 2000，轻轻混匀，室温孵育5分钟；c、将a+b的液体加在一起，轻轻混匀，室温孵育20分钟，使DNA-Lipofectamine 2000复合物形成；3、将100ul DNA-Lipofectamine 2000复合物加入培养板中，轻轻前后摇匀；4、放入37度孵箱中培养24~48h后，1：10传代，加入G418筛选。加入G418的量最好设几个梯度或者转染前做MTT，找好G418对你所转细胞致死量的浓度。5、等细胞在G418作用下，长满后冻存几支（保种）。再克隆化培养：将细胞消化后计数50个细胞，加入22ml完全培养基中，混匀，分装在96孔板中（200ul/孔）。第二天在显微镜下，寻找孔中有单个细胞的孔并做标记，等做标记的孔长满后，消化、转移到4孔或6孔培养板中，最后转移到培养瓶中培养，冻存，鉴定。6、鉴定成功后，建议马上做后续实验，因为在培养过程或冻存中，转进去的基因容易从细胞中掉下来。