5个回答
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2段蛋白分别构建到同一个载体上，共转染293是可以实现共表达的，因为：在瞬转的情况下，基因不需要复制即可表达；在稳转的情况下，基因可以同时整合到基因组中，同样可以共表达。而在大肠杆菌中，大肠杆菌分裂很快，质粒如果不能在大肠杆菌中复制，会在培养的过程中迅速丢失。如果需要两个质粒分别携带不同基因转化后共表达，需要两种质粒都稳定复制。因此这两个质粒属于不同的不相容群，携带不同的抗生素，则可以在双抗生素压力下实现共表达。当然也有人将同一不相容群的不同抗性的质粒转化大肠杆菌，同时使用两种抗生素的压力维持两种质粒的存在而实现共表达。 |
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完全可以，楼主所说共表达不是融合表达，是共同表达。 如果是真核表达，把两个表达框构建到一个载体上进行转化或转染就可以实现共表达了,有一些现成的用于共表达的载体。动物细胞中还有IRES载体可用于共表达。如果是大肠杆菌或其他原核生物共表达，可以构建两个顺反子到一个载体上，但是步骤可能会比较多，载体比较大，可能会影响质粒复制而影响表达效果。而如果两个顺反子有较大同源部分，则还需要考虑因重组导致的不稳定。Novagen新出的一款载体pETDuet-1，使用两个T7启动子、两个RBS分别表达两个基因，不过只有一个T7终止子，可以满足楼主的需要。 |
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好像风险很大，两个蛋白如果连在一起表达，表达出来的就是这2个蛋白的融合结合蛋白了，是否还能保持各自亚基的功能就很难说了。如果想在一个载体上，单独的，分别表达出2个单体蛋白，貌似不显示，这样需要一个质粒上有2个翻译起始端，我个人是没有看到过这样的文献 |
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两个蛋白的生产中很普遍了 最常见就是表达抗体 ，重链轻链要一起表达 ，我这三个蛋白共表达原核，真核都有表达成功的例子——就用一个载体将三个基因用RBS连接后克隆到载体的一个表达盒里 转录出一条mRNA链条 再依靠RBS分别翻译出三个蛋白 |
