2024-04-27 03:33:01

用凝胶渗透色谱法(GPC)测寡糖分子量,为什么算不对?

用岛津的凝胶渗透色谱(色谱柱 TSK-gel GW PWXL2500)和软件,算酶解寡糖分子的分子量, 结果相差很大,用其他方法算, 大约1000-2000Da(数均),而用凝胶色谱法大约只有200-300。几乎就是差一个数量级。 但是,多个样品之间的变化规律,两种方法测是一致的,( 哪个大,哪个小,大多少,算出来都一样)。怀疑是软件计算出了什么问题,但是我找不出来。

我用的是右旋糖酐做分子量标准,是个比较通用的标准了, 使用的方法,是测别的糖的方法,和文献里优化的方法不同,但是感觉应该还能用,最主要的几个峰还是有的。标准分子量 ,六个点,在 180 到 12000 之间,请问大家出的是什么问题? 

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2个回答

应该是标定分子量的对照品使用不当,PEG分子量最低200都有

2024-04-27 03:35:08

有几个问题请先确认下,

1)你所说的其他方法是不是用MALS测得的绝对分子量。

2)我这边看的标准曲线线性范围为3000以下,使用的标准品是PEG,建议去咨询下他们那边的技术支持,确保使用葡聚糖苷的话,在180的分子量还在色谱柱的线性范围内。

3)计算用峰位分子量的话,结果怎么样?

    

2024-04-27 04:18:35

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