在分离过程中发现有两种物质不论是极性还是分子量都非常接近,硅胶柱是一起下来的,sephedex也是一起下来,但薄层后在紫外下明显是两种颜色,为什么啊?
看来这两种物质可能结构上为类似物,性质也相近。建议重新选择过柱的洗脱条件,或者考虑混合溶媒重结晶。
量小的话可以走制备液相分开,分离度好肯定能分开。
还有一种情况是两种物质存在互变,怎么分都分不开。或者不稳定,在柱子上变了,比如氧化。