我们有敲入CRE酶的老鼠，作基因鉴定时理论上敲入与未敲入应该是有不同位置的条带作区别，大小相差几十bp，在250bp左右的位置。但一直PCR后电泳出来，只有敲入的老鼠有条带，未敲入的老鼠都是看不到条带，百思不得其解啊，望有经验的前辈指点！步骤的话，粗提鼠尾DNA， 反应条件就是按的takara 热启动酶的推荐条件，94度变性，55退火，72延伸，跟说明书一模一样的。最后水平电泳。
可能未敲入鼠的DNA没有提取出来。 先证明未敲入鼠的DNA提取成功，如果证明提取成功了，再考虑别的原因。
看看引物设计是否有问题，也许是刚好某段引物设计在插入区，野生型没有该段序列所以P不出来呢？
退火温度呢？是文献支持的么，这两个退火温度可能不一样。
