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2024-04-19 21:12:34

western blot 胶片一片黑，怎么改进啊？

重复多次WB，改变上样量，做抗体浓度梯度，大面积裁膜孵育一抗，可是TMUB1这条带始终曝光后是一片黑，其余都能曝出。因为其余的目的蛋白都能曝出，操作应该没有错误，还能怎么改进才能曝出条带。试着裁了块不相干的条带（分子量离得很远）孵TMUB1的抗体，最后曝出来也是一片漆黑。这说明了什么啊？
图中条带是内参，下面模糊的是TMUB1，只压了几秒，稍微再久点就是漆黑一片了。

图片1.png

细胞生物学免疫学

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有可能是一抗的问题，也可以试试调调二抗的浓度

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2024-04-19 22:00:24

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提问时间：	2024-04-19
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