1.影响凋亡的通路很多，首先要看很多文献，把重要的搞清楚。
2.为何要选WNT通路？一定要搞清楚，不能随便拿个通路来试。有哪些研究支持你选这条通路，或者你的药物有可能作用于什么位点，从而让你选这条通路？
3.这种药物是不是已知的诱导凋亡的药物？还是已有药物，但没有凋亡方面的研究？还是你自己合成的？如果是已知的药物，对药物的作用机理要有非常清楚的认识。
4.实验第一步：MTT检测药物对细胞增殖的影响。如果没影响，那就没必要往下做了。如果可以抑制增殖，那就筛选一下药物浓度。一般选取72h 的IC50来进行后续实验。
5.实验第二步：证实凋亡的存在。

经典wnt通路有代表性的蛋白是β-catenin及靶基因cyclinD1和c-myc。你可以先用WESTERN筛选看看，β-catenin最好还做免疫荧光，观察细胞定位改变。同时还得检测β-catenin/Tcf转录活性。

1. 该药物导致凋亡；

2. 该药物能够影响wnt通路活性（beta-catenin细胞定位，转录活性等），要看是激活还是抑制；

3. 如果是激活wnt通路，研究该药物作用于细胞后导致凋亡是不是通过WNT通路，最可行的方法是通过RNAi下调beta-catenin的表达或deltaN TCF4(TCF4 的dominant negative)或其他能阻断wnt信号通路的活性的方法，然后观察该药物是否还能导致细胞凋亡；如果下调wnt活性后，该药物导致凋亡能力下降，则说明，该药物是通过激活wnt通路（at least in part）导致凋亡的；如果是抑制wnt通路，研究该药物作用于细胞后导致凋亡是不是通过WNT通路，最可行的方法是通过表达不被降解的beta-catenin或其他活化wnt信号通路的活性的方法，然后观察该药物是否还能导致细胞凋亡；如果上调wnt活性后，该药物导致凋亡能力下降，则说明，该药物是通过抑制wnt通路（at least in part）导致凋亡的；

4. 随后可以研究具体通过什么wnt靶基因作用的。以上拙见，希望能有所帮助！如有错误，请指正！