请教一下，大家做转基因的怎么来挑取克隆细胞？

细胞转染后用药物筛选一下，可以长出来克隆，不知大家怎么挑取的？
我用过滤纸法，可能是不得法，细胞不往滤纸上粘，还在皿里。

遗传学基因工程

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最好的方法就是在96孔板或48孔板进行药物筛选，这样很简单就得到单克隆了。虽然用的板子多，但得到的单克隆是相对比较高，也非常容易消化获得单克隆的细胞，我们经常用这个方法的。

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2024-05-03 02:05:21

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可以在大皿上筛选，使用微量胰酶消化法收集单克隆细胞。筛克隆不难，但是想要筛到好的克隆就不那么容易了。

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2024-05-03 02:09:24

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我们实验室,是用自己做的克隆环(就是自己用那个口服液的小瓶的瓶环,用钳子掰下来,干热160度2h灭菌),用镊子夹着放在克隆上,刚好把克隆套上,之后不要移动克隆环,然后滴加少许胰酶消化,最后加含血清培养液终止即可.其实克隆环就是起着将克隆固定的作用.很好用的。

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2024-05-03 02:13:58

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个人建议用96孔板，虽然看细胞、给细胞换液什么的非常麻烦，但是对于筛克隆还是比用大皿容易些，细胞没那么容易老化死掉，特别是对于转染效率低的实验相对有效些。用枪头自作克隆环我也尝试过，但是环固定不了，加液的时候容易移动。另外一个问题是加的胰酶基本都集中在环和皿底接触的位置，中间的细胞消化不到，如果要使中间的细胞消化下来，胰酶用量就必须比较大。
个人实验过程中的一些心得体会，体细胞转基因的稳定筛选确实是很头疼的问题，不知大家有什么更好的方法没有？

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2024-05-03 02:14:56

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提问时间：	2024-05-03
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请教一下，大家做转基因的怎么来挑取克隆细胞？

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