CHOK1表达单抗,碱性峰比例达到百分之二十,如何降低到百分之十二以下?因为是细胞株刚筛选出来,现在做初步工艺开发,工艺在调整,D12时细胞状态较如何降低细胞培养抗体碱性峰比例差,有没有可能会是这个原因,做的是曲妥珠,谢谢。跟罗氏对比,酸性峰低于罗氏,而碱性峰高(20%),碱性峰有两个,第一个碱性峰很高,第二个碱性峰很低,主峰含量在75%左右。
采用CPB即羧肽酶B消化后HPLC对比看看差别,如果属于C末端K的差异导致的,或者是P-amideted导致的,或者切去糖链分析糖基差异。知道原因后调整优化策略。
纯化能够去除部分碱性峰!碱性峰能够去除5%-10%,总收率能够达到70%-80%。
针对细胞培养环节,提高培养基中Cu2+浓度,降低Zn2+浓度,可以增强重组抗体C端脯氨酸的酰胺化,最终导致重组抗体发生碱性电荷变异。细胞培养环节是否可以反其道而行,从而降低碱性峰。