2020-06-10 19:59:42

收集菌体后,进行超声破碎前是否需要用裂解菌体的裂解液?

大肠杆菌表达重组蛋白后,离心收集菌体,进行超声破碎前是否需要用裂解菌体的裂解液?裂解菌体的裂解液怎么配制?

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细胞生物学× 生物物理学×

3个回答

用什么裂解液得看细菌裂解后干啥用

2020-06-10 20:00:09

如果你表达的重组蛋白在上清的话,不需要用裂解液,直接用PBS超声就可以了.如果在沉淀的话需要用裂解缓冲液才行.
裂解缓冲液的配方:EDTA 0.47g,Tris 1.51g,NaCl 1.46g,溶解在水中,调pH到8,定容到200mL

2020-06-10 20:01:50

超声破碎前,必须先用TE溶液把菌体洗两遍,然后用溶菌酶进行破壁,再进行超声破壁。

2020-06-10 20:05:39

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