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2024-04-26 05:35:03

PEI瞬时转染

在做293悬浮细胞瞬时转染时，转染复合物制备过程中，室温孵育20min左右，是不是孵育时间越久越好呢？更换293transfx培养液时，是不是一定要将细胞培养液去除干净，残留的细胞培养液对转染影响大吗？转染复合物加入细胞6h后，即可更换细胞培养液正常培养表达，是否转染复合物加入细胞培养久点更好？例如过夜。

药理学

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3个回答

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瞬转影响因素较多，可以做工作改进的地方也很多，转染试剂、细胞株、增强剂、培养基等。我们也在做293悬浮瞬转，你是在用Freestyle 293吗？这个表达量还是比较一般的，我们现在用的优化的protocol。

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2024-04-26 05:35:22

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将DNA 与培养液先混合之后再加入PEI 后，室温放置20分钟左右再加入细胞中就OK了。

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2024-04-26 05:35:43

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当然不是越久越好啊，转染复合物是有毒性的，时间久了细胞受不了，我们一般都是八小时后换培养基。

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2024-04-26 05:35:59

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提问时间：	2024-04-26
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