我没有用过黑色壁，透明底的板子，所以第二个问题不好回答.至于第一个问题,这样的值也是可以接受的,如果觉得比值太大,可以稍微增加海肾质粒的量。

我跟DEP2005有相同的情形，海肾荧光素酶的值随着firefly luciferase的值增高而增高，此问题如何克服？

我也遇到和楼主相同的问题，我和我同学一起做的，我的细胞数量比他的多，用的比例是一样的，他的结果很好，我的结果就像楼主所描述那样，我想请教下这种异常结果会不会是因为我的细胞数量的关系导致的呢？

TK-rellina少就多转点，一般和Luc 比例为：Luc：Rellina=10:1
还有不能用黑板子吧，测luc是要用白板子全反射光来测量，黑板透明底不都吧光吸收和透过了么，怎么测？

我的荧光素值只有几十啊，是不是转染效率太差的原因？

renilla luciferase的信号通常要比firefly高一到两个数量级，如果RL信号那么低，肯定是哪里有问题。

调整下2种转染质粒的比例看看

萤火虫luc半衰期长，而Rluc半衰期只有2min，楼主用酶标仪检测Rluc发光值，给96孔板加完检测液恐怕Rluc就已衰减至很低了吧

首先萤光素酶活性检测属于发光实验，检测时必须用不透明的白板或黑板，如果用透明的板交叉干扰很大，造成检测结果有偏差，再有您用的酶标仪是什么型号的，有发光检测功能吗？因为这个实验对仪器的要求比较高，最好用专用的发光检测仪检测。您测得的海肾的读值太低，基本上都是无效读值，萤火虫的也不太高，这类实验如果转染效率高一般结果至少要在万级以上。至于萤火虫和海肾两个读值哪个高，这和载体的转染量和转染比例有关，可以调整。