在进行real time PCR 之前,我将部分样本的RNA反转录为(随机引物)cDNA但是由于反转录前没有测RNA的浓度,所以现在的cDNA浓度并非等量的total RNA,所以我想请教大家,如果说反转录的过程RNA是等量的反转录成cDNA,那么现在能否测cDNA浓度,而不需要再测RNA浓度了?因为我的RNA样品反复冻融,怕降解了,谢谢指教!
有个反转录效率的问题要考虑吧,你能保证每个样本的反转录效率一样吗?