60%乙醇提取物乙酸乙酯萃取前三次，水层是黄色，乙酸乙酯层颜色逐渐变浅，萃取第四遍静置一夜，水层变成古铜色，乙酸乙酯层颜色更深了，是氧化了还是有其它原因？
氧化了居多。也有可能是乙酸乙酯是由乙酸（醋酸）和乙醇化和而来，乙酸乙酯和乙醇长时间接触，乙酸乙酯不会水解产生醋酸根离子 从而表现出酸性，然后和溶液中的金属离子等反应产生有颜色的醋酸盐或醋酸化和物，然后颜色就加深了。
你加点亚硫酸钠或者硫代硫酸钠到水相，再萃取看看（萃取完毕盖好筛子），就知道是不是氧化的问题了。
