2024-04-15 17:14:25

要分离的样品过硅胶柱后竟然不见了,为什么?

我要从植物乙酸乙酯提取物里面分一个化合物,这个化合物氯仿-甲醇9:1时Rf 0.3。我先过硅胶柱,在92:8的时候把这个点洗下来,然后过了凝胶柱、ODS柱、石油醚-乙酸乙酯硅胶柱,这个时候比较纯了,我再过一次硅胶柱,氯仿甲醇洗,96:4时这个点上面的主要杂质点下来了,可是后面却一直没有我要的点下来,我一直洗到氯仿甲醇7:3了,还不行就甲醇洗,结果连甲醇里面都没有..........郁闷死啦,这个点究竟去哪里了呢?还吸附在硅胶上吗?怎么会不见了呢,大家快来帮忙啊,谢谢了

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药物化学×

4个回答

要目标分离,建议用Htlc或者HPLC进行色谱跟踪分离。另外,你过的柱子太多了吧,如果该化合物在植物体内的含量本来不高的话,由于过柱次数太多,加上合并、点板以及其他损失,可能在分离过程中就耗光了。建议楼主仔细查看自己的色谱方法学是否正确!

2024-04-15 18:35:27

也或许是你的样品量太低,从柱子上来时流分里的浓度过低,这样你直接点板就找不到东西了,建议浓缩后在点样。如果还是没找到的话那就歇菜吧,十有八九是没了。

2024-04-15 18:41:43

你要的目标点纯化后可能跟之前性质有不同,薄层不显色的不一定就不存在,可以试试用紫外或液相,或换种检测器。我觉得是没必要再冲下去了。

2024-04-15 19:51:25

上柱前都不称重的吗?我觉得不会丢失,除非量太少,你要的点跟杂质比太少。也不大可能还吸附在柱子上。薄层检测是杂质点量更多吗?我觉得还是应该再检查一下之前的流分。


2024-04-15 19:59:52

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