2022-08-12 12:39:52

小鼠脑组织甲醛固定、冰冻切片染CD31免疫荧光染不出?

做小鼠脑组织染CD31(BD),组织是甲醛固定2小时后冰冻切片做免疫荧光,CD31一直出不好,有时同样条件同一个老鼠的脑片染出来也是时而有时而没有荧光,有时一个脑片只是某些部位有,而不是整个脑子都有,这是不是因为甲醛固定封闭了抗原位点的原因呢?如果用抗原修复,哪种修复方法比较好,求指教谢谢各位大神!!


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5个回答

同样的抗体,有的出有的不出,有的出的好有的出的不好,说明抗体是没有问题的,有时候出有时候不出说明你的操作肯定有问题,要保证实验条件一致,另外要小心实验中试剂流液,孵育完后最好检查下组织上试剂是否有流走


2022-08-12 12:55:09

可以试试酶修复,漂片高温修复不太合适。


2022-08-12 12:56:48

一般都是抗体的原因

2022-08-12 13:02:49

甲醛固定完,甲醛泡30分钟以内,CD31出的挺好,泡时间长了就不出了


2022-08-12 13:06:43

染完色以后确实会变深,和有没有透明没有关系,树脂封片以后镜下的颜色会是正常的

2022-08-12 13:17:59

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