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2024-04-20 07:16:49

小鼠脑组织甲醛固定、冰冻切片染CD31免疫荧光染不出？

做小鼠脑组织染CD31（BD），组织是甲醛固定2小时后冰冻切片做免疫荧光，CD31一直出不好，有时同样条件同一个老鼠的脑片染出来也是时而有时而没有荧光，有时一个脑片只是某些部位有，而不是整个脑子都有，这是不是因为甲醛固定封闭了抗原位点的原因呢？如果用抗原修复，哪种修复方法比较好，求指教谢谢各位大神！！

神经生物学

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5个回答

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同样的抗体，有的出有的不出，有的出的好有的出的不好，说明抗体是没有问题的，有时候出有时候不出说明你的操作肯定有问题，要保证实验条件一致，另外要小心实验中试剂流液，孵育完后最好检查下组织上试剂是否有流走

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2024-04-20 07:32:06

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可以试试酶修复，漂片高温修复不太合适。

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2024-04-20 07:33:45

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一般都是抗体的原因

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2024-04-20 07:39:46

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甲醛固定完，甲醛泡30分钟以内，CD31出的挺好，泡时间长了就不出了

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2024-04-20 07:43:40

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染完色以后确实会变深，和有没有透明没有关系，树脂封片以后镜下的颜色会是正常的

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2024-04-20 07:54:56

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提问时间：	2024-04-20
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