Lipo3000转染,没有用Opti-MEM稀释,而是用完全培养基稀释了,孵育后直接加在好有全培养基的细胞板上!质粒会不会转不进去?而且孵育时间稍长(超过5min),会不会影响结果!还是要重新做?
孵育时间到没有多大影响。用了完全培养基稀释的话肯定会有影响的。转染效率估计会大打则扣啊。转染效率可能会很低。
完全培养基里面是含有血清的,是对转染效率有一定影响的。具体影响有多大,不同的细胞也是不一样的。最好还是先按照试剂说明书做,如果实在没有opti-MEM的话,可以用无血清培养基代替。
可以试一试英格恩的转染试剂,培养基里可以加一定量的抗生素和血清,而且细胞如果生长状态好的话,不用换液。