2017-02-14 14:16:59

分离生物碱的溶剂系统加入氨水会有什么影响?

我用硅胶柱分离生物碱,用的是石油醚:丙酮:氨水,比例是10ml:10ml:40ul ,过下来的洗脱液的颜色特别深,比上样前的颜色要深的多,以前加过二乙胺,颜色也是特别深.我想问一下各位,这颜色和氨水有关吗?有什么解决办法吗?因为加氨水确实能稍微改善一下拖尾情况。


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洗脱液颜色变深,应该与氨水有关,好多化学成分尤其是黄酮、色素等成分颜色会随溶液pH增加而颜色加深,即所谓的红移,洗脱液中可能有这些杂质造成颜色加深。解决办法:洗脱液用酸调小PH。


2017-02-14 14:27:55

洗脱剂中加了氨水,这不是很好的方法,如果用硅胶柱分离生物碱,建议用氯仿-甲醇体系,分离生物碱用氧化铝柱有时比硅胶柱好。由于生物碱在硅胶柱上吸附太强,有时很难分离到纯品,有人用制备薄层方法,得到很好的效果,另外我以前试过减压层析,效果不错。回到你的问题,洗脱液颜色深,可能是杂质如黄酮等在碱性条件下造成,也可能是氨在柱上被氧化造成(二乙胺放久了,自身颜色也会加深),但是,你只要比较一下在上柱前后,在TLC薄层上,样品中的生物碱点是否发生了变化,如果没有变化,说明样品没变,但还要设法去掉其他杂质。因此以后用硅胶柱分离生物碱,洗脱剂中千万不要加氨水或二乙胺。

2017-02-14 14:37:00

正丁醇部位的生物碱,极性已相当大了,用正相硅胶柱分离比较困难,而且吸附太强,样品损失也会严重,我建议你用反相柱C18试试,上反相柱样品基本不会损失,分离不好还可以回收。同时可配合其他方法,如葡聚糖凝胶LH-20,它在分离中有时相当有用,用氯仿-甲醇1:1或单用甲醇就行,起到分子筛的作用,同时对芳性化合物及酚性化合物兼有吸附作用。


2017-02-14 14:39:19

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