2024-05-26 04:20:59

细胞与生物材料共培养的问题

刚开始做生物材料生物相容性方面的研究。有个问题想咨询一下大家。谢谢!

我准备做细胞增殖实验,把细胞接种至生物材料上,用cck-8试剂盒检测其OD值判断材料对细胞增殖的影响。我的问题是:

1.细胞接种密度的问题。我养的是大鼠的BMSC,拟用48孔板培养,文献报道大多为96孔板或2孔板,48孔板不太多,所以想请教一下大家细胞接种密度多少合适?

2.CCK-8试剂盒说明说每孔加10ul CCK-8液,但这是针对96孔板而言,48孔板的话是不是需要翻倍,加20ul?

3.文献中报道的方法都是说先加一部分含细胞悬液的培养基,孵育一段时间再加培养基。为什么要这样做,为什么不可以一次加至目标量?为什么要分两次加?

4.我们实验室的酶标仪比较老,没有设置48孔板的检测,所以只能用处理后,把上清吸至另一96孔板检测,这样会对结果有影响吗?

5.关于对照和空白组设置,我觉得应该以单纯细胞悬液无材料作为对照组,但实验室有师兄说应该把材料+不含细胞的培养基作为对照组,很困惑。


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3个回答

个人认为细胞若是接种到材料上,其接种密度应根据材料的面积大小计算,而不是多少孔板。分两次铺细胞,是为了让细胞在材料上生长。


2024-05-26 04:21:25

1、cck8的添加量是不是可以问问试剂商。 5、对照组 我觉得应该是无材料组;有无材料是干预因素吧。


2024-05-26 04:21:51

你好,我最近也准备开始做细胞材料共培养的实验,先滴加细胞悬液,之后再加培养基,是因为孔板可能更加适合细胞生长,所以如果直接把材料放在含细胞的培养基中,细胞可能在材料上生长不好。另外对照组的问题,如果你研究的是材料和细胞共培养之后带来的一系列效应,那么空白组应该是要材料的

 


2024-05-26 04:22:20

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