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2024-04-24 12:01:52

P65的磷酸化和IkB的磷酸化可以反映NF-kB的激活，到底是采用western检测P65、磷酸化P

各位，关于NF-kB的激活，我查了一些资料，有人认为通过western研究P65的表达量可以反映NF-kB的激活。因为P65的磷酸化和IkB的磷酸化可以反映NF-kB的激活，我比较困惑的是到底采用western检测P65、磷酸化P65还是IkB呢？是检测胞浆中的蛋白吗？如果是检测P65，NF-kB激活时，P65是升高还是降低呢？谢谢！

肿瘤与细胞

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提取细胞全蛋白，然后测定磷酸化的P65表达，如果表达增高，则说明NF-kB p65被激活，此时内参用总NF-kB。2、分别提取细胞核以及胞浆蛋白，然后分别测定核内以及胞浆内的NF-kB的含量，评价NF-kB的转位情况。
如果既有磷酸化增高，也有核内NF-kB含量增高的话，则说明NF-kB被激活。
IkB是NF-kB的上有激活因子，也可以测定。

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2024-04-24 12:02:15

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我也在做，其实用报告基因测测还是比较方便的！我用的就是Promega的双荧光报告基因系统测的！

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2024-04-24 12:02:38

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IKB 不能这么笼统地说是NF-KB上游的激活因子吧？P-IKB是它的激活因子，而IKB的总量应该在激活后下降。

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2024-04-24 12:03:23

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WB挺好的

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2024-04-24 19:15:47

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提问时间：	2024-04-24
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