2024-04-28 22:23:18

westblot蛋白免疫印迹实验跑小分子蛋白(15kd)条带是波浪状,为什么?

westblot蛋白免疫印迹实验跑小分子蛋白(15kd)条带一直是波浪状,有人说是胶的问题,可同时跑了36kd蛋白,条带是直的,有人说是要恒流跑,电压不要太大,我的转膜条件是50v,50min,请指点.


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4个回答

我现在在做大小为17Kda的蛋白,我跑胶是15%的胶,恒压跑,先80V跑到分离胶在120V,当然你也可以80V跑到底,转膜是恒流转膜,你可以这个条件试试,蛋白样品得处理好,上样前最好离心一下。


2024-04-28 22:26:54

从结果看来,蛋白条带都几乎连到了一起,有可能是因为胶孔之间有缝隙,或者蛋白上样后放置太久导致蛋白扩散。


2024-04-28 22:28:57

我也遇到相同的情况了,但是以前没出现过,应该不是样品的问题,我怀疑就是梳孔里面不整齐。

2024-04-28 22:30:30

一个小建议,蛋白上样前离心一下。


2024-04-28 22:33:28

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